Staphylococcus aureus klinik izolatlarında metisilin direncinin tespiti için sefoksitin disk difüzyon yönteminin kullanımı

Abstract

Bu çalışmada, metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) izolatlarının tespiti için sefoksitin disk difüzyon yöntemi ile oksasilin buyyon mikrodilüsyon ve ağar tarama yöntemlerinin karşılaştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya alınan 94 S.aureus klinik izolatında PBP2a varlığı lateks aglütinasyon MRSA-Screen (Oxoid Ltd, UK) test ile araştırılmış ve 64'ünün (%68) pozitif olduğu saptanmıştır. Sefoksitin disk difüzyon yöntemi ve oksasilin buyyon mikrodilüsyon ve ağar tarama yöntemleri, "Clinical and Laboratory Standards Institute" (CLSI) tarafından önerildiği şekilde uygulanmıştır. PBP2a pozitif olan 64 S.aureus izolatının hepsi hem ağar tarama hem de buyyon mikrodilüsyon yöntemi ile oksasiline dirençli bulunurken, PBP2a negatif olan 30 izolat her iki yöntemle de duyarlı olarak saptanmıştır. Sefoksitin disk difüzyon sonuçlarına göre, 62 izolatın zon çapları 0-14 mm, iki izolatın 15-17 mm ve 30 izolatın da 20 mm olarak bulunmuş ve CLSI'nin önerdiği sefoksitin zon çaplarına göre 64 izolatın oksasiline dirençli olduğu belirlenmiştir. Sonuç olarak bulgularımız, sefoksitin disk difüzyon yönteminin özgüllük ve duyarlılığının, gerek altın standart olarak kabul edilen PBP2a varlığı gerekse oksasilin buyyon mikrodilüsyon ve ağar tarama yöntemleri ile karşılaştırıldığında %100 olduğunu göstermiştir. Dolayısıyla bu yöntem, ekonomik kısıtlılıklar nedeniyle moleküler testlerin kullanılamadığı rutin laboratuvarlarda MRSA izolatlarının tespitinde güvenilir bir yöntem olarak kullanılabilir.

The aim of this study was to compare the cefoxitin disc diffusion method with oxacillin broth microdilution and agar screening methods for the detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). The presence of PBP2a in 94 S.aureus clinical isolates were screened by latex agglutination MRSA-Screen test (Oxoid Ltd, UK), and 64 (68%) of the strains were found positive. Cefoxitin disc diffusion method and oxacillin broth microdilution and agar screening methods were performed in the guidance of Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) proposals. All of the 64 PBP2a positive isolates were found resistant, and 30 PBP2a negative isolates were detected as susceptible to oxacillin by both of the broth microdilution and agar screening methods. In cefoxitin disc diffusion method, zone diameters of 62 isolates were measured as 0-14 mm, while two isolates gave 15-17 mm and 30 isolates gave >20 mm zone diameters. According to the CLSI proposals, 64 isolates were accepted as oxacillin-resistant in view of their cefoxitin zone diameters. As a result, the sensitivity and specificity of cefoxitin disc diffusion method was detected as 100%, when comparing with both gold standard (PBP2a presence) method and oxacillin broth microdilution and agar screening methods, indicating that it is a reliable test to investigate oxacillin resistance of clinical S.aureus isolates in routine laboratories where molecular tests could not be performed due to economical reasons.