Postnatal gelişim sürecinde sıçan koklear nukleusundaki nöron sayısının fiziksel fraksiyonlama metodu ile belirlenmesi / Bülent Ayas; Danışman Adnan Korkmaz.

Abstract

Koklear nukleus (KN), koklear sinir ile kokleadan gelen tüm aksonları alan ve bilgileri daha yüksek işitme merkezlerine aktaran beyin sapının ilk ara durak çekirdeğidir. Bunun yanında KN, her biri kendine özgü fizyolojik cevapları olan oldukça farklı nöron tipleri de içermektedir. Bu özgün yapılanmadan dolayı KN, işitme sistemi ile ilgili birçok fizyolojik ve patolojik olayın değerlendirilmesinde önemli bir çalışma bölgesi olarak ele alınmıştır. Toplam nöron sayısının belirlenmesi işlemi, bu değerlendirmeler için vazgeçilmez bir başlangıç adımı olarak görülmektedir. Ancak bu konu ile ilgili KN çalışmalarının verileri birbirleri ile belirgin bir çelişki içerisindedir. Bu durum, tarafsız stereolojik metotların kullanıldığı çalışmalar için de geçerlidir. Sunulan çalışma, sayı parametresinin hesabında altın standart olarak değerlendirilen fiziksel fraksiyonlama metodu ile bu verilerin yeniden değerlendirilmesi amacıyla planlandı. Bu amaçla postnatal (P) 5, P7, P9, P12, P15 ve P30 günlük sıçanların VCN'leri (KN'nin iki ana alt çekirdeğinden biri) kullanıldı. Perfüzyonla tespit ve rutin parafin takibinden sonra, beyin sapları koronal düzlemde 4 µm kalınlığında kesildi. Pilot çalışma verilerimize dayanarak her 30. kesit çifti (P5 ve P7 günlük gruplar için her 20.) sistematik rasgele olarak örneklendi ve cresyl violet ile boyandı. VCN'yi içeren kesitlerde yine sistematik rasgele örnekleme ile belirlenmiş belirli bir fraksiyonda nöron sayımı yapıldı. Toplam nöron sayısı, sayılan nöronların bu fraksiyonların tersi ile çarpılmasından elde edildi. Sonuç olarak, VCN nöronlarının postnatal 12. güne kadar devam eden bir artış gösterdiği tespit edilmiştir. Toplam nöron sayısında bu günde gözlenen önemli bir düşüşten üç gün sonra, tekrar belirgin bir artış başlamış ve postnatal 30. günde yetişkin seviyelerine ulaşmıştır. Bu sonuçlar, kemiricilerde işitmenin başladığı dönemde (postnatal 10 - 12. günler) nöron sayısında bir değişikliğin olduğunu bildirilen daha önceki çalışma bulguları ile örtüşmektedir. Ancak onlarda belirtilen değişimin şekli ve nöron sayılarının değerleri ile çelişki halindedir.